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【求助】双荧光酶报告基因过表达质粒能不能直接用目标转录因子直... 已解决
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【求助】双荧光酶报告基因过表达质粒能不能直接用目标转录因子直接代替
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2015-04-16 11:14
不妥,转录因子直接进入细胞的效率肯定不如质粒转染效率高,即使成功进入细胞,如果进入比例不高,如何证明转录因子确实已进入了细胞,也是比较难的(用WB法,可能表达不够显著)。
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2015-04-17 07:10
湘雅沂哥 谢谢,准备转染细胞是悬浮细胞,担心质粒转染效率,所以才考虑直接用转录因子,细胞是HL-60. |
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2015-04-12 20:54
molei1231.蛋白质直接转入细胞的方法前提一般是要把细胞固定和破膜。这只是细胞膜的问题,然后还是这个蛋白质是要入核的,如果是没有体内的天然的翻译加工后过程,人为加转录因子还是很难可以过细胞膜,还要过核膜。而DNA相对来讲,会容易一些。 2.你觉得是有了DNA,然后可以生成很多蛋白质的方法好,还是直接给蛋白质比较好 3.转入双质粒,可以直接说是in vivo下的,转录因子在转录翻译后的蛋白质水平直接调控和识别启动子。 |
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