【求助】一个新的化学实体（new medicine enti..._反应底物_生物分子_生化试剂_知道

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游客	收藏 \| 举报 2007-12-16 00:33 关注：226 回答：3 【求助】一个新的化学实体（new medicine enti... 已解决悬赏分：0 - 解决时间 2024-09-30 08:13 【求助】一个新的化学实体（new medicine entity）的酶促反应动力学参数怎么测啊？底物浓度在Km值附近，但是不知道它的Km值是多少怎么办呢？

游客	举报 2007-12-19 03:34 一般用大鼠或人的肝微粒体（microsomes）建立代谢反应体系；体系中加入待测的新化学实体（NME），使体系中其保持一系列的终浓度，比如：1uM、5uM、10uM、50uM、100uM、200uM、300uM、500uM（经过数次试验最终确定合适的浓度范围）；每个浓度点平行3份； 37°孵育后，HPLC检测；我试验的数据采用GraphPad Prism4.0处理，直接通过非线性拟合求出Km与Vmax；结果如下：